转录因子DREB1A基因的克隆与植物表达载体的构建

植物研究 ›› 2004, Vol. 24 ›› Issue (2): 211-214.

转录因子DREB1A基因的克隆与植物表达载体的构建

李晶, 朱延明, 李杰

东北农业大学, 哈尔滨 150030

收稿日期:2003-10-05 出版日期:2004-06-15 发布日期:2016-06-14
作者简介:李晶(1970-), 女, 博士, 副教授, 主要从事植物学教学及植物基因工程的研究

Cloning of transcription factor DREB1A gene and the construction of plant express vector

LI Jing, ZHU Yan-Ming, LI Jie

Northeast Agricultural University, Harbin 150030

Received:2003-10-05 Online:2004-06-15 Published:2016-06-14

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank中已发表的转录因子DREB1A基因的cDNA序列设计并合成了一对引物,通过RT-PCR的方法从低温处理的拟南芥总RNA中扩增出DREB1A基因的全长cDNA片段。将其克隆到pMD18 T-vector中。经测序证明该片段与GenBank上报道的序列具有99.8%的同源性。2个碱基的置换导致了一处氨基酸的差异,但这一氨基酸并不在基因的功能结构域上,推测其不会影响基因功能。以植物表达载体pBch为基础,构建了由组成型启动子35S调控的DREB1A基因的植物表达载体pBDR35S,为利用DREB1A基因改良植物抗逆性奠定了物质基础。

关键词: 转录因子, DREB1A, 基因克隆, 植物表达载体构建

Abstract: According to the cDNA sequence of transcription factor DREB1A gene in GenBank a pair of primer was designed and synthesized.Using the total RNA of low temperature treated Arabdopsis thaliana seedling as templet,the full length of cDNA of DREB1A gene was amplified through method of RT-PCR.It was cloned into pMD18 T vector.DNA sequencing indicated that the cloned fragment showed 99.8% identity to the sequence of the gene in GenBank.The Two bases change leads to only one amino acid changed.But the changed amino acid is not in the function domain so the cDNA will have the normal physiology function.The plant express vector pBch was digested and ligated with the cloned cDNA fragment and got the DREB1A gene express vector pBDR35s regulated by 35S promoter.

Key words: transcription factor, DREB1A, gene cloning, construction of plant express vector

李晶, 朱延明, 李杰. 转录因子DREB1A基因的克隆与植物表达载体的构建[J]. 植物研究, 2004, 24(2): 211-214.

LI Jing, ZHU Yan-Ming, LI Jie. Cloning of transcription factor DREB1A gene and the construction of plant express vector[J]. Bulletin of Botanical Research, 2004, 24(2): 211-214.

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