酿酒酵母HAL1基因的克隆及植物表达载体的构建

植物研究 ›› 2003, Vol. 23 ›› Issue (4): 433-436.

酿酒酵母HAL1基因的克隆及植物表达载体的构建

付畅^{1, 2}, 杨传平¹, 刘桂丰¹, 李淑娟¹, 姜静¹

1. 东北林业大学森林资源与环境学院, 哈尔滨 150040;
2. 哈尔滨师范大学生命科学与环境学院, 哈尔滨 150080

收稿日期:2003-02-06 出版日期:2003-12-15 发布日期:2016-06-14
通讯作者: 杨传平(1957-),男,博导,研究方向:林木遗传育种。Tel:0451-82190006,E-mail:yangcp@mail.nefu.edu.cn E-mail:yangcp@mail.nefu.edu.cn
作者简介:付畅(1974-),女,博士研究生,研究方向:林木遗传育种。
基金资助:
国家重大基础研究发展规划项目973项目(G19999016003)

CLONING OF HAL1 GENE FROM SCCHAROMYCES CEREVISIAE AS2.375 AND THE CONSTRUCTION OF PLANT EXPRESSION VECTOR OF HAL1 GENE

FU Chang^{1, 2}, YANG Chuan-Ping¹, LIU Gui-Feng¹, LI Shu-Juan¹, JIANG Jing¹

1. Department of Forest Resource and Environment, Northeast Forestry University, Harbin 150040;
2. Department of Life and Environment, Harbin Normal University, Harbin 150080

Received:2003-02-06 Online:2003-12-15 Published:2016-06-14

摘要/Abstract

摘要： HAL1基因是酵母中重要的耐盐基因。以酿酒酵母AS2.375菌株的DNA为模板,根据已发表的序列设计引物,经PCR扩增得到约900 bp的HAL1基因片段,连接到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌JM109,筛选重组质粒进行酶切分析和序列测定,结果显示已克隆到完整的可读框,该基因的序列与已知序列同源性达99%。将HAL1基因从T-载体上切下连接到pAM194载体上构建了HAL 1基因的植物表达载体,用于烟草的转化获得了耐盐性提高的转化植株。

关键词: 酵母, HAL1 基因, 克隆, 耐盐

Abstract: HAL1 gene is an important salt tolerant gene in yest.Total genomic DNA was isolated from Sccharomyces cerevisiae AS2.375.An about 900 bp DNA fragment was obtained with PCR technique by using the primer that designed according to the published sequence.The DNA fragment was cloned to T vector and transformed to E. coli strain JM109.The restriction map of the recombinant plasmid was analyzed and the DNA fragment was sequenced.The result showed that the entire open reading frame had been cloned and the identity of it's sequence to the published sequence is more than 99%.After cutting the HAL1 fragment from the T vector, we ligated the fragment to the pAM194 vector and obtained the plant expression vector of HAL1 gene.The transformants of tobacco with improved salt tolerant have been screened.

Key words: Sccharomy cescerevisiae, HAL1 gene, cloning, salt tolerant

付畅, 杨传平, 刘桂丰, 李淑娟, 姜静. 酿酒酵母HAL1基因的克隆及植物表达载体的构建[J]. 植物研究, 2003, 23(4): 433-436.

FU Chang, YANG Chuan-Ping, LIU Gui-Feng, LI Shu-Juan, JIANG Jing. CLONING OF HAL1 GENE FROM SCCHAROMYCES CEREVISIAE AS2.375 AND THE CONSTRUCTION OF PLANT EXPRESSION VECTOR OF HAL1 GENE[J]. Bulletin of Botanical Research, 2003, 23(4): 433-436.

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