大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建

doi:10.7525/j.issn.1673-5102.2009.04.011

植物研究 ›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (4): 445-452.doi: 10.7525/j.issn.1673-5102.2009.04.011

大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建

张雨良¹;王希东¹;张桦¹;杨峰山²;姚正培¹;石庆华^1*

(1.新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室,乌鲁木齐830052) (2.黑龙江大学生命科学学院黑龙江省高校微生物学重点实验室,哈尔滨150080)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-07-20 发布日期:2009-07-20
通讯作者: 石庆华
基金资助:

Cloning of Hordeum vulgare Yield Related gene HvYrg1 and Construction of Its Plant RNA Interfere Vector

ZHANG Yu-Liang;WANG Xi-Dong;ZHANG Hua;YANG Feng-Shan;YAO Zheng-Pei;SHI Qing-Hua*

(1.Xinjiang Agricultural University Agronomy Department,Xinjiang Agricultural University Agricultural Biotechnology Key Laboratory,Urumqi830052) (2.Heilongjiang University Life Science Department,Heilongjiang Microbiology Key Laboratory,Harbin150080)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-07-20 Published:2009-07-20
Contact: SHI Qing-Hua
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摘要/Abstract

摘要： 大麦谷粒是受多个数量性状基因(QTL)控制的复杂性状，而RING E3泛素连接酶在决定大麦产量和蛋白质降解途径中起到极为重要的作用。本研究按照同源克隆的方法，依据水稻、拟南芥、玉米、小麦和酵母等E3泛素连接酶保守区域设计引物，采用RT-PCR方法从西藏大麦中克隆出产量相关基因HvYrg1全长cDNA序列，包括完整的开放阅读框架(ORF)1 275 bp，编码蛋白为424个氨基酸(GenBank No. EU333863)。同源性比较结果显示，它与GenBank上已报道的水稻GW2基因同源性最高为86%。以植物表达载体pCAMBIA2300-35s-OCS质粒为基础，构建由35s启动子调控的HvYrg1基因的RNA干扰载体pCAM-RNAi-HvYrg1。这一载体的成功构建为研究该基因在作物产量的功能鉴定打下了很好的基础。

关键词: 大麦, HvYrg1基因, 克隆, RNA干扰

Abstract: Barley grain is a complex trait controlled by QTL, and RING E3 ubiquitin ligase plays a vital role in grain yield and protein degradation pathway. According to the conservative region of E3 ubiquitin ligase family homologous sequences, such as rice, Arabidopsis, corn, wheat and yeast, one pair of specific primers was designed and used to clone the corresponding gene from barley by RTPCR amplification. The results showed that a full-length cDNA sequence of HvYrg1 gene from Tibetan barley was obtained, which includes a integrity of open reading frame (ORF) 1 275 bp, encoding 424 amino acids (GenBank No. EU333863). Homology comparison showed that HvYrg1 gene shared 86% identity with rice GW2 gene reported in GenBank. Based on plant expression vector pCAMBIA2300-35s-OCS plasmid, we constructed a plant RNAi vector driven by 35 s promoter, namely pCAM-RNAi-HvYrg1 to further investigate its functions on crop yield formation.

Key words: Hordeum vulgare, HvYrg1 gene, cloning, RNA interfere

中图分类号:

张雨良;王希东;张桦;杨峰山;姚正培;石庆华*. 大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建[J]. 植物研究, 2009, 29(4): 445-452.

ZHANG Yu-Liang;WANG Xi-Dong;ZHANG Hua;YANG Feng-Shan;YAO Zheng-Pei;SHI Qing-Hua*. Cloning of Hordeum vulgare Yield Related gene HvYrg1 and Construction of Its Plant RNA Interfere Vector[J]. Bulletin of Botanical Research, 2009, 29(4): 445-452.

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大麦产量相关基因HvYrg1的克隆及植物RNA干扰载体的构建

Cloning of Hordeum vulgare Yield Related gene HvYrg1 and Construction of Its Plant RNA Interfere Vector

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