CYP79F1基因对西兰花的遗传转化的研究

doi:10.7525/j.issn.1673-5102.2014.04.015

植物研究 ›› 2014, Vol. 34 ›› Issue (4): 516-523.doi: 10.7525/j.issn.1673-5102.2014.04.015

CYP79F1基因对西兰花的遗传转化的研究

王红波；李成；曹阳理惠；李晶^*

东北农业大学农业生物功能基因重点实验室，哈尔滨　150030

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2014-07-20 发布日期:2014-07-20
通讯作者: 李晶
基金资助:

Genetic Transformation of CYP79F1 Gene in Brassica oleracea var. italica

WANG Hong-Bo;LI Cheng;CAO Yang-Li-Hui;LI Jing*

Key Laboratory of Agricultural Biological Functional Genes,Northeast Agricultural University,Harbin　150030

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2014-07-20 Published:2014-07-20
Contact: LI Jing
Supported by:

摘要/Abstract

摘要： 建立有效的遗传转化体系是基因工程手段改良植物性状的重要前提。本研究对西兰花遗传转化体系进行了初步研究，成功地建立了农杆菌介导的西兰花遗传转化体系。以7日龄无菌苗的下胚轴为外植体，预培养2~3 d后进行农杆菌的侵染，共培养后将外植体转移至无筛选压力的脱菌培养基中，暗培养7 d后置于含有10 mg·L^-1卡那霉素的筛选培养基中继续培养，待不定芽生长至2~3 cm时转入0.1 mg·L^-1 IBA的生根培养基中诱导不定根，最后进行驯化和移栽，PCR分子鉴定及外源基因表达水平检测结果证明，我们已经成功地将芥子油苷合成关键酶基因CYP79F1基因转入西兰花商业品种“青秀”中，利用HPLC检测转基因植株中短链脂肪族芥子油苷的含量显著增加。

关键词: 西兰花, 农杆菌, 遗传转化体系, 芥子油苷, CYP79F1

Abstract: Establishment of effective transformation system is an important precondition to improve plant traits by genetic engineering. In this study, an agrobacterium-mediated transformation system of Brassica oleracea var. italica was established. Hypocotyls of 7-day-old seedlings were used as explants and preincubated for 2-3 d and infected by agrobacterium-tumefaciens. After co-incubation, the explants were transferred to degerming medium without selective agent to induce adventitious buds. Following the incubation in darkness for 7 d, the explants were transferred to selective medium containing 10 mg·L^-1 kanamycin. When the adventitious buds grew 2-3 cm long, they were moved to rooting medium with 0.1 mg·L^-1 IBA to induce adventitious roots. Finally, the domestication and transplantation were performed. PCR detection demonstrated that glucosinolate biosynthetic gene CYP79F1 was successfully transferred into the genome of B.oleracea var. italica commercial cultivar “Qingxiu”. HPLC determination proved that short chain aliphatic glucosinolates significantly increased in transgenic plants.

Key words: Brassica oleracea var. italica, Agrobacterium-tumefaciens, genetic transformation system, glucosinolate, CYP79F1

中图分类号:

Q789

王红波;李成;曹阳理惠;李晶*. CYP79F1基因对西兰花的遗传转化的研究[J]. 植物研究, 2014, 34(4): 516-523.

WANG Hong-Bo;LI Cheng;CAO Yang-Li-Hui;LI Jing*. Genetic Transformation of CYP79F1 Gene in Brassica oleracea var. italica[J]. Bulletin of Botanical Research, 2014, 34(4): 516-523.

[1]	罗萍, 张昊楠, 徐建民, 胡冰, 王晓萍, 李光友, 范春节. 发根农杆菌介导的尾巨桉遗传转化体系的建立[J]. 植物研究, 2022, 42(3): 512-520.
[2]	贾姗姗, 王燕燕, 于放. 超声辅助提高长春花毛状根诱导效率及转基因毛状根构建[J]. 植物研究, 2018, 38(4): 604-610.
[3]	杨艳芳, 武剑, 朱凯, 刘黎卿, 陈发棣, 喻德跃. 过量表达菊花DmDREBa基因提高转化烟草耐低温能力[J]. 植物研究, 2016, 36(5): 721-729.
[4]	陆玉建, 张韩杰, 韩文瑜, 沈志强. 农杆菌介导rd29A启动子驱动otsB基因转化紫茉莉的研究[J]. 植物研究, 2016, 36(3): 401-408.
[5]	王传琦;张献贺;王红波;于欣鑫;李晶*. 拟南芥PMSR2对脂肪族芥子油苷侧链的修饰作用[J]. 植物研究, 2014, 34(2): 226-231.
[6]	周祥明;;郝志愚;夏时云;王姝;宋建;陈受宜;刘仲齐. 根癌农杆菌介导合欢转TaNHX2基因体系的优化[J]. 植物研究, 2013, 33(2): 197-201.
[7]	于海娣;王慧梅;付玉杰*. 木豆毛状根的诱导及其培养条件的研究[J]. 植物研究, 2012, 32(4): 481-483.
[8]	姚庆荣;郭运玲;孔华;贺立卡;郭安平*. 影响根癌农杆菌介导的木薯遗传转化因素分析[J]. 植物研究, 2012, 32(2): 227-231.
[9]	沙琰琰;李晓莉;史团省*;张俊;王亚杰. 农杆菌介导蜡质基因WIN1转化烟草的初步研究[J]. 植物研究, 2011, 31(6): 702-707.
[10]	周小梅;许瑾;王慧;李君剑*. 中草药浸提物对农杆菌抑制和对黑麦草愈伤组织生长、分化影响[J]. 植物研究, 2010, 30(3): 365-368.
[11]	肖艳华;曾幼玲;兰海燕;张富春*. 农杆菌介导的天绿香遗传转化影响因素的研究[J]. 植物研究, 2008, 28(5): 564-567.
[12]	葛艳辉;崔继哲*;于丽杰;宋文华. 影响农杆菌介导白细胞介素-2基因转化番茄的因素研究[J]. 植物研究, 2006, 26(4): 470-474.
[13]	徐淑红, 徐香玲. 植物遗传转化中抑菌剂的选择[J]. 植物研究, 2004, 24(4): 491-494.
[14]	陈廷速, 张军, 夏宁邵, 陈如凯, 李杨瑞. 根癌农杆菌介导的芦荟遗传转化条件的研究[J]. 植物研究, 2004, 24(1): 125-128.
[15]	张彦妮, 曲敏, 徐香玲, 李新玲. 发根农杆菌介导几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因转化烟草的研究[J]. 植物研究, 2003, 23(2): 198-203.

CYP79F1基因对西兰花的遗传转化的研究

Genetic Transformation of CYP79F1 Gene in Brassica oleracea var. italica

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价