濒危物种胡杨和灰叶胡杨总DNA提取及RAPD体系优化

doi:10.7525/j.issn.1673-5102.2012.03.012

植物研究 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (3): 320-325.doi: 10.7525/j.issn.1673-5102.2012.03.012

濒危物种胡杨和灰叶胡杨总DNA提取及RAPD体系优化

焦培培¹;王彦芹¹;庞新安¹;李志军^1,2*

1.新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室,阿拉尔　843300；2.塔里木大学植物科学学院，阿拉尔　843300

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2012-05-20 发布日期:2012-05-20
通讯作者: 李志军
基金资助:

Total DNA Extraction and RAPD System Optimization of Endangered Plant Populus euphratica and P.pruinosa

JIAO Pei-Pei;WANG Yan-Qin;PANG Xin-An;LI Zhi-Jun;*

1.Key Laboratory of Biological Resource Protection and Utilization of Tarim Basin,Xinjiang Production and Construction Group,Alar　843300；2.College of Plant Sciences,Tarim University,Alar　843300

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2012-05-20 Published:2012-05-20
Contact: LI Zhi-Jun
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摘要/Abstract

摘要： 以濒危物种胡杨和灰叶胡杨硅胶干燥的叶片为材料，研究其总DNA提取方法及RAPDPCR体系优化条件。结果表明，用改良CTAB法提取的DNA适用于胡杨和灰叶胡杨的RAPD分析。优化的胡杨和灰叶胡杨RAPD-PCR体系为：20 μL的反应体系中含Mg²⁺ 2.5 mmol·L^-1、dNTP 0.15 mmol·L^-1、引物0.2 μmol·L^-1、模板DNA 100 ng和1.5 U Taq DNA聚合酶。用6条多态性引物对优化体系的稳定性进行检测，结果显示扩增结果稳定，多态性丰富。该优化体系为在分子水平开展胡杨和灰叶胡杨的保护生物学研究提供了技术支持和参考。

关键词: 胡杨, 灰叶胡杨, DNA提取, RAPD体系优化

Abstract: An improved method based on CTAB was used to extract the total DNA from dry leaves of endangered plant Populus euphratica and P.pruinosa, and to research their reaction system of RAPD-PCR. The results showed that the total DNA extracted by the improved CTAB method could be fit for the RAPD analysis of P.euphratica and P.pruinosa. A suitable RAPD-PCR system for P.euphratica and P.pruinosa was developed as follows: 20 μL PCR solution, including 2.5 mmol·L^-1 Mg²⁺, 0.15 mmol·L^-1 dNTP, 0.2 μmol·L^-1 primer, 100 ng DNA template and 1.5 U Taq DNA polymerase. By testing the stability of the system with 6 polymorphic primer pairs, the results indicated that the developed system could amplify stably and keep a rich polymorphism. These results provided a reference for the further research on both P.euphratica and P.pruinosa at molecular level.

Key words: Populus euphratica, P.pruinosa, DNA extraction, RAPD optimization

中图分类号:

S727.23

焦培培;王彦芹;庞新安;李志军;*. 濒危物种胡杨和灰叶胡杨总DNA提取及RAPD体系优化[J]. 植物研究, 2012, 32(3): 320-325.

JIAO Pei-Pei;WANG Yan-Qin;PANG Xin-An;LI Zhi-Jun;*. Total DNA Extraction and RAPD System Optimization of Endangered Plant Populus euphratica and P.pruinosa[J]. Bulletin of Botanical Research, 2012, 32(3): 320-325.

[1]	张宏斌, 吕东, 赵明, 赵祜, 赵兴鹏, 李伟. 基于全基因组SNP分子标记分析青海云杉遗传结构[J]. 植物研究, 2022, 42(3): 373-382.
[2]	谢望, 李天静, 李鑫窈, 杨丰铭, 姚银安, 高永峰. 胡杨PeNAC121基因启动子的分离鉴定和胁迫应答模式分析[J]. 植物研究, 2022, 42(2): 234-242.
[3]	代雅琦, 刘艳萍, 韩路, 王海珍. 地下水埋深对胡杨叶片光合作用及抗氧化物质积累的影响[J]. 植物研究, 2022, 42(2): 299-308.
[4]	黄文娟, 焦培培, 黄金花, 张丹. 塔里木河流域胡杨叶片解剖结构比较研究[J]. 植物研究, 2016, 36(5): 669-675.
[5]	司婧娜；周韬；徐放；薄文浩；邬荣领*. 胡杨无性系幼苗响应盐胁迫的miRNA表达差异研究[J]. 植物研究, 2015, 35(6): 836-842.
[6]	李加好；冯梅；李志军*. 胡杨叶片碳水化合物及可溶性蛋白特征与叶形变化和个体发育阶段的关系[J]. 植物研究, 2015, 35(4): 521-527.
[7]	丁浩；郑唐春；梁德洋；曲冠证. 一种简易高效提取多种植物纯净DNA的方法[J]. 植物研究, 2015, 35(3): 457-461.
[8]	王桂芹；郑玉华；胡顶超. 胡杨茎次生维管组织特点与生境之间的关系[J]. 植物研究, 2015, 35(1): 11-15.
[9]	陈旭辉;高玉葆*;朱敏杰;赵婷婷. 小叶锦鸡儿基因组DNA的提取及AFLP反应体系的建立[J]. 植物研究, 2009, 29(5): 529-533.
[10]	张青青;徐海量;叶茂;李吉玫;杨红梅;牛俊勇. 不同地下水埋深下胡杨叶片生理指标变化特点[J]. 植物研究, 2009, 29(4): 453-459.
[11]	安娜;郭宏波*;周铜水;吴千红. 党参基因组DNA提取、ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选[J]. 植物研究, 2009, 29(3): 346-351.
[12]	陈析丰;查笑君;范文杰;马伯军*. 山茶花叶片DNA提取及RAPD反应体系的研究[J]. 植物研究, 2007, 27(2): 218-223.
[13]	朱馨蕾;马艳;张富春. 盐胁迫下胡杨cDNA文库的构建及其nhx*基因的克隆[J]. 植物研究, 2007, 27(1): 82-88.
[14]	刘建平, 周正立, 李志军, 龚卫江, 高山, 于军. 胡杨、灰叶胡杨果实空间分布及其数量特性的研究[J]. 植物研究, 2005, 25(3): 336-344.
[15]	黄华, 郭水良. 外来入侵植物加拿大一枝黄花居群间遗传差异分析[J]. 植物研究, 2005, 25(2): 197-204.

濒危物种胡杨和灰叶胡杨总DNA提取及RAPD体系优化

Total DNA Extraction and RAPD System Optimization of Endangered Plant Populus euphratica and P.pruinosa

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